說(shuō)起免疫療法，很多人可能都已經(jīng)知道PD-1和CAR-T，但這只是冰山一角。
1986年的體外研究表明，從手術(shù)切除的惡性黑色素瘤中獲得的人源TILs含有能夠特異性識(shí)別自體腫瘤的T淋巴細(xì)胞，當(dāng)存在大量的腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞時(shí)，表明機(jī)體啟動(dòng)了對(duì)抗腫瘤的免疫反應(yīng)。
這些研究使得Rosenberg1988年首次證明使用自體TILs的過(guò)繼性T細(xì)胞療法可以介導(dǎo)轉(zhuǎn)移性惡性黑色素瘤患者的腫瘤客觀消退。
研究表明，浸潤(rùn)腫瘤的免疫細(xì)胞數(shù)量與患者的生存機(jī)會(huì)成正比。黑色素瘤是具有相對(duì)高的突變負(fù)荷的癌癥之一，腫瘤被這些免疫細(xì)胞浸潤(rùn)。
Rosenberg認(rèn)為，癌細(xì)胞入侵時(shí)，自身的免疫系統(tǒng)會(huì)試圖打敗體內(nèi)蔓延的腫瘤。
過(guò)去三十年間，他和他的團(tuán)隊(duì)一直在致力做一件事情：如何發(fā)現(xiàn)并放大“打敗”工作做得最好的那部分免疫系統(tǒng)細(xì)胞。這就是TIL--瘤浸潤(rùn)的淋巴細(xì)胞。
目前，美國(guó)國(guó)家癌癥研究所NCI在這方面已經(jīng)取得了非常大的成功，并且已在其他主要癌癥中心實(shí)施治療，例如Moffitt癌癥中心。
2019年，F(xiàn)DA授予腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（TIL）治療方法LN-145為突破性的治療指定，這是用于實(shí)體瘤的細(xì)胞免疫療法首次獲此殊榮，相信距離上市也僅是時(shí)間問(wèn)題，一旦FDA批準(zhǔn)，這將是首款用于實(shí)體瘤的細(xì)胞免疫療法，將給癌癥患者帶來(lái)巨大的生存獲益。
在癌癥的早期階段，免疫系統(tǒng)試圖通過(guò)動(dòng)員淋巴細(xì)胞的特殊免疫細(xì)胞來(lái)攻擊腫瘤。淋巴細(xì)胞具有識(shí)別和攻擊腫瘤流量的能力，并深入腫瘤。這些細(xì)胞被稱(chēng)為腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（TIL），是由免疫界泰斗Rosenberg及其團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)的。
Rosenberg博士認(rèn)為它們才是深入到敵軍內(nèi)部打擊能力最強(qiáng)的免疫細(xì)胞，但是由于一些原因(比如腫瘤微環(huán)境和PD-1)，他們的功能受到了抑制，不能在腫瘤組織中有效的殺傷腫瘤細(xì)胞。但是，科學(xué)家通過(guò)一些體外培養(yǎng)方法把這些腫瘤組織中的某類(lèi)型的淋巴細(xì)胞富集起來(lái)，再回輸給患者，就能夠發(fā)揮抗腫瘤作用，而且聯(lián)合PD-1效果會(huì)更好。
首先免疫細(xì)胞來(lái)源不同，TIL的免疫細(xì)胞來(lái)自于腫瘤組織，而其他細(xì)胞免疫療法大部分來(lái)取自血液，這直接決定了免疫細(xì)胞識(shí)別腫瘤的能力。據(jù)估計(jì)，腫瘤里分離出的免疫細(xì)胞，有60%以上能識(shí)別腫瘤，而血液里面分離的免疫細(xì)胞，不到0.5%。
其次，這種新型的療法不是簡(jiǎn)單的擴(kuò)增回輸，而是要確定患者病例中特定的突變。之后利用突變信息找到能夠最有效瞄準(zhǔn)這些突變的T細(xì)胞，最后提取出專(zhuān)門(mén)患者腫瘤中細(xì)胞突變的T細(xì)胞，這些細(xì)胞具有精準(zhǔn)識(shí)別癌細(xì)胞的能力。
Rosenberg對(duì)常見(jiàn)胃腸道癌的患者的研究證明了不同患者之間免疫應(yīng)答的獨(dú)特性。通過(guò)對(duì)75位患者的生物學(xué)樣本進(jìn)行全外顯子測(cè)序，確定了124個(gè)新抗原的TIL。他們發(fā)現(xiàn)，83％（62）的患者培養(yǎng)的TIL能夠試別自體腫瘤細(xì)胞表達(dá)的1.6％的體細(xì)胞突變。99%的新抗原決定簇在每個(gè)癌癥患者中都是完全不同的。因此，必須從每個(gè)癌癥患者中取出細(xì)胞，確定哪些細(xì)胞可以真正識(shí)別和攻擊癌癥，將這些細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，擴(kuò)增才能起到治療效果，這是非常復(fù)雜的。
第三，這些免疫細(xì)胞經(jīng)過(guò)體外培養(yǎng)后，重新注入到患者體內(nèi)。同時(shí)，研究團(tuán)隊(duì)聯(lián)合使用了免疫增強(qiáng)藥物白細(xì)胞介素2和另一種“明星抗癌藥”P(pán)D-1抑制劑Keytruda，Keytruda即屬于另一種免疫療法免疫檢查點(diǎn)阻斷，在某些癌癥中有顯著的效果。
基于上述操作過(guò)程，該新療法被認(rèn)為是為患者“量身定制”。
一，晚期結(jié)直腸癌4年無(wú)進(jìn)展
在2016年發(fā)表的文獻(xiàn)中，埃里克·特蘭（Eric Tran）與羅森伯格（Rosenberg）和其他研究人員合作，研究了使用這種方法成功治療轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者的方法。接受靶向KRAS G12D突變的TIL治療后，患者肺部的七個(gè)轉(zhuǎn)移灶中6個(gè)病灶消失殆盡，其中三個(gè)完全消失，患者在4年后仍然沒(méi)有疾病進(jìn)展。
二，晚期宮頸癌完全緩解
一名患有轉(zhuǎn)移性鱗狀細(xì)胞癌并接受了多種聯(lián)合化療方案，包括順鉑，長(zhǎng)春新堿和博來(lái)霉素，然后用吉西他濱加順鉑聯(lián)合放療。隨后發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移，包括主動(dòng)脈旁，雙側(cè)肺門(mén)，顱下和髂骨部位（圖1A和1C）。治療后，她在所有疾病部位都完全消退（圖1A和1C）。
另一患者患有轉(zhuǎn)移性腺癌。她的原發(fā)性腫瘤對(duì)化放療無(wú)效。隨后轉(zhuǎn)移到更多的腹膜后淋巴結(jié)和肝臟表面，在TIL治療前，她在腹膜后，腹壁，旁系，肝旁和盆腔部位有腫瘤進(jìn)展（圖1B和1d）。在治療后，出現(xiàn)完全的臨床緩解（圖1B和1d）。
三，晚期膽管癌成為十年超級(jí)幸存者！
據(jù)報(bào)道，通過(guò)使用靶向蛋白ERBB2IP突變的TIL療法，晚期膽管癌肝轉(zhuǎn)移，術(shù)后出現(xiàn)雙肺多發(fā)轉(zhuǎn)移的患者也取得了令人震驚的治療效果。
當(dāng)超過(guò)1000億個(gè)專(zhuān)門(mén)識(shí)別腫瘤細(xì)胞的免疫細(xì)胞，浩浩蕩蕩地進(jìn)入了這位已經(jīng)到了鬼門(mén)關(guān)患者的體內(nèi)。 效果真的驚人！她全身腫瘤開(kāi)始迅速縮小，體力恢復(fù)很快。
下面的對(duì)照?qǐng)D可以非常明顯看到，第二次治療前肺部布滿的腫瘤，包括一些個(gè)頭非常大的，第二次TIL治療20個(gè)月后復(fù)查，這些腫瘤都非常顯著的縮小了，現(xiàn)在她已經(jīng)成為了十年幸存者！
四，晚期乳腺癌完全緩解！
2018年，《自然醫(yī)學(xué)》（Nature Medicine）上發(fā)表的一份報(bào)告描述了在用對(duì)4種突變蛋白（SLC3A2，KIAA0368，CADPS2和CTSB）的TILs治療的患者中成功治療化學(xué)難治性激素陽(yáng)性轉(zhuǎn)移性乳腺癌。在報(bào)告發(fā)表時(shí)，反應(yīng)已經(jīng)持續(xù)進(jìn)行了22個(gè)月以上，并且患者在4年后仍然沒(méi)有疾病。
22個(gè)月后，這名患者的腫瘤（黃色箭頭）消失得無(wú)影無(wú)蹤（圖片來(lái)源：《Nature Medicine》）
一、首個(gè)實(shí)體瘤細(xì)胞免疫療法獲FDA突破性療法稱(chēng)號(hào)！
2019年6月，F(xiàn)DA批準(zhǔn)腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（TIL）治療方法LN-145為突破性的治療指定，這是用于實(shí)體瘤的細(xì)胞免疫療法首次獲此殊榮，相信距離上市也僅是時(shí)間問(wèn)題，一旦FDA批準(zhǔn)，這將是首款用于實(shí)體瘤的細(xì)胞免疫療法，將給癌癥患者帶來(lái)巨大的生存獲益。
FDA此次授予是基于正在進(jìn)行的第二階段innovaTIL-04（C-145-04）積極的試驗(yàn)的數(shù)據(jù)，摘要數(shù)據(jù)顯示，晚期宮頸癌患者的TIL治療總體反應(yīng)率（ORR）為44％。
在2019年2月4日的數(shù)據(jù)截止時(shí)，有27名可評(píng)估的患者。
■ 44％（12名）的患者有效果，包括1名完全應(yīng)答，9名部分應(yīng)答和2個(gè)未確認(rèn)的部分應(yīng)答；
■ 疾病控制率為89％；
■ 中位隨訪時(shí)間為3.5個(gè)月，12例患者中有11例持續(xù)應(yīng)答；
■ 沒(méi)有任何嚴(yán)重的副作用發(fā)生。
疾病控制率89%！首個(gè)迎戰(zhàn)實(shí)體瘤的細(xì)胞免疫療法獲FDA突破性療法稱(chēng)號(hào)！
二、疾病控制率80%，晚期黑色素瘤的新希望
LN-144是由Iovance公司近期研發(fā)的基于自體腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（TIL）的另一種專(zhuān)門(mén)針對(duì)黑色素瘤的免疫療法，這是一種基于T細(xì)胞的過(guò)繼性細(xì)胞療法（ACT）。此外過(guò)繼性細(xì)胞療法還有大家知道的用T細(xì)胞受體（TCR）或基因工程改造表達(dá)嵌合抗原受體（CAR）的自體T細(xì)胞，回輸?shù)交颊唧w內(nèi)以誘導(dǎo)自身免疫的抗腫瘤作用。
Iovance的創(chuàng)新細(xì)胞療法是基于患者自身的TIL。這些TIL在癌癥發(fā)生時(shí)會(huì)遷移到腫瘤處并且對(duì)腫瘤發(fā)起攻擊。然而，通常患者體內(nèi)的TIL數(shù)目不足以消滅腫瘤，而且腫瘤微環(huán)境會(huì)抑制TIL的功能。Iovance的T細(xì)胞癌癥免疫療法從患者體內(nèi)獲取腫瘤組織并且提取TIL，然后在體外使用IL-2細(xì)胞因子刺激TIL的擴(kuò)增。這一體外刺激手段不但增加了TIL的數(shù)量，而且激活TIL的抗腫瘤能力。然后這些TIL被注回患者體內(nèi)，更有效地殺傷腫瘤細(xì)胞。
在一項(xiàng)最新的2期臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，66例接受過(guò)PD-1治療晚期黑色素瘤患者的試驗(yàn)中：
1、疾病控制率（DCR）高達(dá)80％；
2、客觀緩解率達(dá)到38%，包括2例（3％）完全緩解，23例部分緩解（35％）和28例（42％）病情穩(wěn)定；
3、中位隨訪時(shí)間為8.8個(gè)月，未達(dá)到中位反應(yīng)持續(xù)時(shí)間。
更引人注目的是，患有PD-L1陰性的患者也有響應(yīng)，這說(shuō)明對(duì)免疫檢查點(diǎn)抑制劑無(wú)效的患者仍能獲益于TIL療法。
對(duì)于PD-1治療后進(jìn)展的患者，幾乎沒(méi)有其他治療選擇，這種治療方案的效果幾乎無(wú)與倫比。
第一步，我們得到病人的腫瘤組織塊，其中混雜著體積較大的腫瘤細(xì)胞（淺藍(lán)色）以及體積小而圓的T淋巴細(xì)胞（紅色，綠色，深藍(lán)色）；
第二步，將不同種類(lèi)的T淋巴細(xì)胞在細(xì)胞板上克隆化，并加入高濃度的IL-2來(lái)選擇培養(yǎng)；
第三步，在IL-2的刺激下不同種類(lèi)的T淋巴細(xì)胞都得到了克隆擴(kuò)增，形成了細(xì)胞群；
第四步，用病人的腫瘤細(xì)胞和擴(kuò)增后的T淋巴細(xì)胞反應(yīng)，凡是能夠發(fā)生殺瘤效應(yīng)的T淋巴細(xì)胞群作為陽(yáng)性TIL群留下（紅色），其余的丟棄（綠色，深藍(lán)色）；
第五步，用負(fù)載了腫瘤特異性抗原的樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）進(jìn)一步擴(kuò)增培養(yǎng)腫瘤特異性的TIL，三周內(nèi)培養(yǎng)10億個(gè)TIL；最后，回輸給預(yù)先做了清髓的腫瘤病人。
目前，這款新型的免疫療法暫未上市，但在全球范圍內(nèi)開(kāi)展了多項(xiàng)針對(duì)各類(lèi)實(shí)體腫瘤（非小細(xì)胞肺癌，結(jié)直腸癌，卵巢癌，黑色素瘤...)的臨床試驗(yàn)，申請(qǐng)流程如下：
1.按要求將病歷資料提交至全球腫瘤醫(yī)生網(wǎng)醫(yī)學(xué)部；
2.醫(yī)學(xué)部初步評(píng)估后匹配合適的臨床試驗(yàn)；
3.向相應(yīng)的試驗(yàn)中心提交病歷資料；
4.評(píng)估通過(guò)后協(xié)助患者參加臨床試驗(yàn)。
免疫腫瘤學(xué)的潛力剛剛開(kāi)始實(shí)現(xiàn)。揭開(kāi)更多的冰山將會(huì)更加詳細(xì)地了解如何控制免疫反應(yīng)，以及將這些治療手段用于臨床獲得益處。每天我們能看到更多的進(jìn)展，我們相信這種治療方法將在未來(lái)幾年取得重大突破，讓我們共同期待。
參考資料： 1.https://www.iovance.com/wp-content/uploads/ASCO2019_Poster_C-145-04_cervical_FINAL.pdf
