近年來，CAR-T細(xì)胞因高度的特異性以及強(qiáng)大的抗腫瘤免疫功能被廣泛應(yīng)用于各種惡性腫瘤的實(shí)驗(yàn)研究和臨床治療，尤其是在血液系統(tǒng)腫瘤領(lǐng)域取得很好的療效。當(dāng)然，CAR-T細(xì)胞不僅僅在血液系統(tǒng)腫瘤領(lǐng)域取得了較大突破，在實(shí)體腫瘤中同樣被認(rèn)為最有前景的腫瘤治療方式之一。
那么，2020年，CAR-T細(xì)胞領(lǐng)域擁有諸多突破性進(jìn)展，本文梅斯醫(yī)學(xué)選取一些重磅級(jí)研究，帶您一起回顧一下CAR-T細(xì)胞領(lǐng)域最有價(jià)值的研究進(jìn)展。
免疫治療在腫瘤治療領(lǐng)域發(fā)揮重要作用，且不斷取得新進(jìn)展，尤以針對(duì)T細(xì)胞活化抑制性通路的單克隆抗體(也被稱為免疫檢查點(diǎn)抑制劑) 和嵌合抗原受體T細(xì)胞（CAR-T細(xì)胞）治療最具代表性。目前，CAR-T細(xì)胞治療在血液系統(tǒng)惡性腫瘤中取得了較好的結(jié)果，但同時(shí)也面臨著很多亟待解決的問題。
殺傷性T細(xì)胞一直被認(rèn)為是免疫系統(tǒng)的主力軍。每個(gè)殺傷性T細(xì)胞都攜帶像抗體受體一樣的受體，可以識(shí)別特定的靶標(biāo)?？茖W(xué)家們一直認(rèn)為，殺傷性T細(xì)胞或多或少地從血液中循環(huán)到組織中，然后再循環(huán)到血液中，隨時(shí)摧毀被識(shí)別的靶標(biāo)。然而，12月10日，來自美國(guó)賓夕法尼亞大學(xué)佩雷爾曼醫(yī)學(xué)院的研究人員分析了人體和獼猴的血液和淋巴液樣本發(fā)現(xiàn)，殺傷性T細(xì)胞通常會(huì)留在血液中，不會(huì)進(jìn)入器官和其他組織，而且淋巴液中存在的CD8 T細(xì)胞，通常是血液以外的器官和其他組織中遷移的CD8 T細(xì)胞，而不是血液中大量存在的經(jīng)典殺傷性T細(xì)胞。這一發(fā)現(xiàn)可能有助于解決免疫學(xué)中的許多難題。
Cell 2020. doi:10.1016/j.cell.2020.11.019
研究人員表示，這一發(fā)現(xiàn)擴(kuò)展了人們對(duì)免疫細(xì)胞功能的深層理解，對(duì)基礎(chǔ)免疫學(xué)的影響重大。同時(shí)，這些發(fā)現(xiàn)可能會(huì)為CAR-T細(xì)胞的研究設(shè)計(jì)、基因編碼和細(xì)胞生產(chǎn)等帶來更加成熟、安全和有效的細(xì)胞治療技術(shù)。
與血液腫瘤不同，實(shí)體腫瘤微環(huán)境錯(cuò)綜復(fù)雜，在微環(huán)境中，存在大量的纖維基質(zhì)和免疫抑制細(xì)胞，而且往往伴隨血管畸形和纖維結(jié)締組織增生。來自賓夕法尼亞大學(xué)佩雷爾曼醫(yī)學(xué)院等機(jī)構(gòu)的研究人員研究發(fā)現(xiàn)，將CAR-T療法與PAK4抑制劑藥物相結(jié)合能促進(jìn)工程化細(xì)胞攻擊腫瘤。
PAK4抑制使GBM對(duì)CAR-T免疫療法產(chǎn)生敏感性.Nature Cancer. doi:10.1038/s43018-020-00147-8
在這項(xiàng)研究中，研究人員通過對(duì)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤小鼠模型進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，抑制PAK4或能降低血管的異常，從而改善T細(xì)胞的浸潤(rùn)并抑制小鼠腫瘤的生長(zhǎng)，大約80%PAK4被敲除的小鼠存活了至少60天，而所有野生型小鼠在腫瘤植入后的40天內(nèi)發(fā)生了死亡。另外，利用EGFRvIII導(dǎo)向的CAR-T細(xì)胞療法和PAK4抑制劑進(jìn)行的研究中，研究者發(fā)現(xiàn)，相比輸注5天后僅接受CAR-T細(xì)胞治療的小鼠相比，聯(lián)合治療的小鼠機(jī)體中腫瘤的生長(zhǎng)減少了近80%，而值得注意的是，即使其它組的小鼠在腫瘤植入后33天內(nèi)發(fā)生了死亡，聯(lián)合治療組中仍然有40%的小鼠存活了下來。
這項(xiàng)研究結(jié)果與之前研究結(jié)論不謀而合，通過抑制PAK4所實(shí)現(xiàn)的血管標(biāo)準(zhǔn)化或能改善藥物的運(yùn)輸，并降低腫瘤的缺氧狀況，從而就能改善腫瘤對(duì)靶向性療法、放療和化療的反應(yīng)率。同時(shí)，這項(xiàng)研究進(jìn)一步揭示了通過PAK3抑制劑來重編程整個(gè)血管微環(huán)境從而促進(jìn)并改善癌癥的細(xì)胞治療。
研究人員表示，這種療法或許并不僅僅局限于腦瘤，由于血管異常幾乎是每一種實(shí)體瘤的常見共同特征，因此其還能被用于治療諸如乳腺癌、胰腺癌等其它類型的癌癥。
過繼性T細(xì)胞療法得以改善實(shí)體瘤的治療，但仍面臨嚴(yán)重不良反應(yīng)及系統(tǒng)性毒性等局限，來自中國(guó)藥科大學(xué)藥物科學(xué)研究院張燦教授團(tuán)隊(duì)研發(fā)出一種更為安全有效的改善T細(xì)胞活力的策略。
研究團(tuán)隊(duì)建立了新型的T細(xì)胞表面錨定技術(shù)，通過模擬跨膜蛋白的特性，利用疏水作用力先將脂質(zhì)錨定在T細(xì)胞膜上，再將脂質(zhì)與藥物脂質(zhì)體通過點(diǎn)擊反應(yīng)偶聯(lián)在T細(xì)胞膜上。
T-Tre/BCN-Lipo-Ava細(xì)胞顯示出增強(qiáng)的TCR集群和免疫學(xué)突觸的形成，抗腫瘤反應(yīng)得到改善.Science Translational Medicine, 12(571), eaaz6667. doi:10.1126/scitranslmed.aaz6667
研究人員將阿伐麥布（Avasimibe）與過繼T細(xì)胞用于實(shí)體瘤聯(lián)合治療，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，新型鼠源工程化TCR-T和人源工程化CAR-T分別在原位黑色素瘤、肺轉(zhuǎn)移黑色素瘤及原位膠質(zhì)母細(xì)胞瘤小鼠模型中展示出優(yōu)異的治療效果。其中，工程化CAR-T細(xì)胞在原位膠質(zhì)母細(xì)胞瘤小鼠模型中的完全緩解率達(dá)到60%，且生存期延長(zhǎng)至100天以上。并且這種聯(lián)用策略具有較好的體內(nèi)安全性。
研究者認(rèn)為，工程化T細(xì)胞的給藥沒有產(chǎn)生明顯的全身副作用，這些細(xì)胞表面錨定的工程T細(xì)胞由于其簡(jiǎn)單的生成和安全性，具有較高的轉(zhuǎn)化潛力，也為細(xì)胞工程化改造提供了新技術(shù)。
肝癌是全球最常見的癌癥致死原因之一，中國(guó)作為肝癌大國(guó)，整體上仍缺乏完善的篩查和規(guī)范的治療體系，據(jù)數(shù)據(jù)顯示，5年生存率目前只有約12%。目前，肝癌的主要治療手段包括手術(shù)切除、放射和介入治療，而這些治療方式對(duì)機(jī)體副作用較大、療效不確定，因而急需尋找新的有效的肝癌治療策略。
來自中國(guó)上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院的研究人員首次報(bào)告了靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）的CAR-T（CAR-GPC3 T）細(xì)胞療法治療肝細(xì)胞癌結(jié)果。
在這項(xiàng)研究中，研究人員對(duì)患有晚期GPC3+HCC（Child-Pugh A）的成年患者在環(huán)磷酰胺（cyclophosphamide）和氟達(dá)拉濱（fludarabine）誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞清除后，接受自體CAR-GPC3 T細(xì)胞治療，并評(píng)估這種療法的有效性和安全性。
CAR-GPC3 T構(gòu)建和研究設(shè)計(jì)示意圖.Clin Cancer Res 2020; DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-19-3259
研究人員收納了13名符合條件的患者，并給予中位數(shù)19.9×108個(gè)CAR-GPC3 T細(xì)胞治療。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，8名患者的CRS（1/2級(jí)）是可逆的。1例患者出現(xiàn)5級(jí)CRS?；颊邲]有出現(xiàn)3~4級(jí)神經(jīng)毒性。隨訪3年，1年和6個(gè)月的總生存率分別為10.5%、42.0%和50.3%。此外，研究人員證實(shí)有2名患者出現(xiàn)部分緩解，其中，1名患者病情穩(wěn)定，在治療44.2個(gè)月后仍然存活。CAR-GPC3 T細(xì)胞增殖與腫瘤反應(yīng)呈正相關(guān)。
總體來說，本研究初步揭示了CAR-GPC3 T細(xì)胞療法的安全性，且CAR-GPC3 T細(xì)胞在晚期肝細(xì)胞癌患者中具有抗腫瘤活性的早期跡象。
CAR-T療法的方法已經(jīng)成功地用于治療淋巴瘤和白血病等血癌患者，CAR-T治療通過添加能識(shí)別癌細(xì)胞表面獨(dú)特特征的抗體片段來對(duì)患者自身的T細(xì)胞進(jìn)行基因改造。在一項(xiàng)新的研究中，來自美國(guó)伊利諾伊大學(xué)厄本那香檳分校、芝加哥大學(xué)和丹麥哥本哈根大學(xué)的研究人員拓寬了潛在的具有短糖鏈連接的蛋白質(zhì)靶標(biāo)，通過基因改造的T細(xì)胞，對(duì)來自人類和小鼠的各種實(shí)體瘤癌細(xì)胞進(jìn)行攻擊。
在某些癌細(xì)胞上異常短的糖鏈?zhǔn)怯赏蛔儗?dǎo)致的，這些突變破壞了這些糖與蛋白質(zhì)連接的分子途徑。研究人員從已知抗體與特定類型的異常糖相互作用開始，該糖與小鼠實(shí)體瘤癌細(xì)胞上的蛋白質(zhì)相連。緊接著，研究人員測(cè)試了異常糖附近氨基酸序列的變化，以判斷是否會(huì)影響受體與該位點(diǎn)的結(jié)合。
237-scFv與Tn-OTS8肽的親和力更高.PNAS, 2020, doi:10.1073/pnas.1920662117.
結(jié)果顯示，Tn-聚糖側(cè)翼的殘基（Tn-OTS8）為相互作用提供了顯著的結(jié)合能。用非同源人類抗原Tn-MUC1進(jìn)行選擇，可產(chǎn)生與多種Tn-糖蛋白廣泛反應(yīng)的scFv變異體。當(dāng)配置為CAR時(shí)，表達(dá)這些scFv變體的工程T細(xì)胞表現(xiàn)出對(duì)O型糖基化缺陷的小鼠和人類癌細(xì)胞系改善的活性。T細(xì)胞現(xiàn)在可以識(shí)別帶有短糖的幾種不同蛋白質(zhì)，與這些異常的糖鏈結(jié)合的藥物可以優(yōu)先識(shí)別癌細(xì)胞。
研究人員表示，癌細(xì)胞在其表面表達(dá)某些蛋白，這些蛋白是由于不同種類的突變而產(chǎn)生的。盡管這些工程化細(xì)胞尚處于早期開發(fā)階段，但可以使用相同的T細(xì)胞產(chǎn)品來研究抗小鼠和人類癌癥的功效和安全性。
發(fā)表在Science雜志上一項(xiàng)研究，公布了對(duì)3名患者進(jìn)行基因編輯CAR-T治療的I期臨床試驗(yàn)結(jié)果。該研究首次證實(shí)了CRISPR / Cas9技術(shù)能夠同時(shí)靶向人類多個(gè)基因的能力。經(jīng)過CRISPR / Cas9基因編輯的CAR-T細(xì)胞可以在癌癥患者體內(nèi)持續(xù)存在幾個(gè)月的時(shí)間，并且能夠穩(wěn)定增殖并發(fā)揮功能。
在傳統(tǒng)的CAR T細(xì)胞療法中，患者的免疫細(xì)胞經(jīng)過遺傳改造用來對(duì)抗癌癥。而本次試驗(yàn)的方法有所差異。研究人員并沒有給予T細(xì)胞轉(zhuǎn)入任何靶向癌細(xì)胞抗原的CAR受體分子，而是首先使用CRISPR / Cas9編輯去除了3個(gè)關(guān)鍵基因。其中2個(gè)基因表達(dá)T細(xì)胞的天然受體，即TCRa與TCRb基因，第三個(gè)基因則表達(dá)PD-1，后者被認(rèn)為是調(diào)控T細(xì)胞活性的關(guān)鍵“檢查點(diǎn)”分子。
CRISPR-Cas9工程T細(xì)胞在患者體內(nèi)的持續(xù)擴(kuò)增和持久性.Science.DOI: 10.1126/science.aba7365
研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相比原始的CAR-T細(xì)胞在體內(nèi)不到一周的生存期，編輯后的細(xì)胞可在體內(nèi)持續(xù)存在長(zhǎng)達(dá)9個(gè)月的時(shí)間。在回輸患者體內(nèi)幾個(gè)月后，研究人員抽取了更多血液，并分離了CRISPR編輯的細(xì)胞進(jìn)行研究。結(jié)果表明，這些細(xì)胞仍然具有殺死腫瘤的能力。
研究人員表示，以前的研究表明這些細(xì)胞在幾天之內(nèi)就會(huì)失去功能，因此，這項(xiàng)研究中的CRISPR編輯細(xì)胞在單次輸注后可以在更長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)保持抗腫瘤功能，這一事實(shí)令人鼓舞。
CD19 CAR-T細(xì)胞療法已被美國(guó)食品藥品管理局（FDA）批準(zhǔn)用于治療某些類型的血液癌癥，即B細(xì)胞淋巴瘤和急性淋巴細(xì)胞白血病。來自美國(guó)希望之城的研究人員將2種強(qiáng)效的免疫療法---溶瘤病毒（oncolytic virus）和嵌合抗原受體（CAR）T細(xì)胞（CAR-T）療法結(jié)合起來，成功地靶向和根除單獨(dú)用CAR-T細(xì)胞療法很難治療的實(shí)體瘤
在體外，腫瘤分解病毒（OV）有效地將CD1t遞送至實(shí)體瘤.Sci Transl Med. 2020 Sep 2;12(559):eaaz1863. doi: 10.1126/scitranslmed.aaz1863.
這項(xiàng)新的研究可能會(huì)擴(kuò)大CD19 CAR-T細(xì)胞的使用范圍，用于治療可能患有任何實(shí)體瘤的患者。在這項(xiàng)研究中，研究人員通過對(duì)溶瘤病毒進(jìn)行基因改造，使之進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，并誘導(dǎo)它們?cè)谀[瘤細(xì)胞表面上表達(dá)CD19蛋白。然后，使用靶向CD19的CAR-T細(xì)胞來識(shí)別和攻擊這些實(shí)體瘤。
研究分析表明，CD19-CAR T細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤殺傷還誘導(dǎo)了垂死的腫瘤細(xì)胞釋放病毒，從而傳播了CD19t的腫瘤表達(dá)。而且，用溶瘤病毒和CAR T細(xì)胞組合治愈的癌癥小鼠表現(xiàn)出保護(hù)性抗腫瘤免疫力的延長(zhǎng)。這說明，免疫系統(tǒng)建立了對(duì)腫瘤的記憶反應(yīng)。
OVm19t促進(jìn)內(nèi)源性T細(xì)胞和過繼轉(zhuǎn)移的mCD19- CAR T細(xì)胞的腫瘤浸潤(rùn).
目前，研究人員正在設(shè)計(jì)一項(xiàng)臨床試驗(yàn)，以對(duì)患者進(jìn)行這種組合測(cè)試。該試驗(yàn)將首先測(cè)試OV19t在實(shí)體瘤患者中的安全性，如果發(fā)現(xiàn)這是安全有效的，則可以依次檢測(cè)溶瘤病毒和CAR T細(xì)胞療法。研究人員稱，溶瘤病毒是一種強(qiáng)大而有前途的方法，可以與CAR-T細(xì)胞療法戰(zhàn)略性地結(jié)合起來，以便更有效地靶向?qū)嶓w瘤。
發(fā)表在Nat Med雜志的一項(xiàng)研究，研究人員描述了一種新型雙CAR-T（Dual CAR T cell, Dual-CAR-T）細(xì)胞免疫療法可以幫助對(duì)抗HIV感染。作為一種新型的CAR-T細(xì)胞，這種Dual-CAR-T細(xì)胞是通過對(duì)T細(xì)胞進(jìn)行基因改造使得同一個(gè)T細(xì)胞表達(dá)兩種CAR。每種CAR都攜帶一個(gè)CD4蛋白，使得它能夠靶向HIV感染細(xì)胞，而且每種CAR還有一個(gè)共刺激結(jié)構(gòu)域，用于向CAR-T細(xì)胞發(fā)出信號(hào)，增加這些T細(xì)胞的免疫功能。第一種CAR含有4-1BB共刺激結(jié)構(gòu)域，可刺激細(xì)胞增殖和持久性，而第二種CAR具有CD28共刺激結(jié)構(gòu)域，可增加這些T細(xì)胞殺傷HIV感染細(xì)胞的能力。
T細(xì)胞在無法控制病毒反彈后，表現(xiàn)出T細(xì)胞衰竭的特征.Nature Medicine. doi:10.1038/s41591-020-1039-5
由于HIV經(jīng)常感染T細(xì)胞，還添加了一種叫做C34-CXCR4的蛋白，這種蛋白可防止HIV附著在T細(xì)胞上，因而也就阻止這種病毒感染它們。最終產(chǎn)生的Dual-CAR-T細(xì)胞壽命長(zhǎng)，在應(yīng)對(duì)HIV感染時(shí)進(jìn)行復(fù)制，有效殺滅被感染的細(xì)胞，并對(duì)HIV感染形成部分抵抗力。
當(dāng)將受保護(hù)的Dual-CAR-T細(xì)胞給送到HIV感染的小鼠體內(nèi)時(shí)，這些研究人員觀察到HIV復(fù)制速度變得較慢，而且相比于未給送Dual-CAR-T細(xì)胞的小鼠，它們具有更少的HIV感染細(xì)胞。研究人員，觀察到這些小鼠血液中的HIV病毒數(shù)量減少，CD4+T細(xì)胞得以保存下來。此外，當(dāng)在HIV感染的小鼠中組合使用Dual-CAR-細(xì)胞細(xì)胞和ART時(shí)，這種病毒被更快地抑制，這就導(dǎo)致HIV病毒庫比僅接受ART治療的小鼠更小。
衰老是細(xì)胞老化的一個(gè)標(biāo)志，并導(dǎo)致許多疾病。一種使免疫細(xì)胞靶向衰老細(xì)胞的新方法可能提供更好的治療選擇。衰老是細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)的一種形式。在某些情況下，它可能是有害的，人們正在努力開發(fā)針對(duì)衰老細(xì)胞的療法。
研究人員，采用了一種目前用于抗癌治療的技術(shù)。在這種療法中，T細(xì)胞從個(gè)體中移除，在回輸之前，對(duì)其進(jìn)行操作，以增強(qiáng)其針對(duì)癌細(xì)胞的能力。這種細(xì)胞被稱為CAR T細(xì)胞，因?yàn)樗鼈儽辉O(shè)計(jì)成表達(dá)所謂的嵌合抗原受體(CAR)。CAR的設(shè)計(jì)目的是識(shí)別并結(jié)合存在于癌細(xì)胞表面的 一種稱為抗原的蛋白質(zhì)的特定片段。如果這種相互作用發(fā)生，T細(xì)胞就會(huì)被激活并殺死腫瘤細(xì)胞。識(shí)別只在腫瘤細(xì)胞上表達(dá)的抗原是一個(gè)關(guān)鍵的挑戰(zhàn)，因?yàn)镃AR T細(xì)胞殺死健康細(xì)胞可能導(dǎo)致嚴(yán)重的副作用。
為了找到針對(duì)衰老細(xì)胞的抗原，研究人員分析了衰老的人和小鼠細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的跨膜蛋白的表達(dá)。對(duì)先前發(fā)表的關(guān)于人類組織中蛋白和RNA表達(dá)的數(shù)據(jù)進(jìn)行的檢查顯示，uPAR要么未被檢測(cè)到，要么，在人體的大部分器官(包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心臟和肝臟)中以低水平存在。然而，研究人員發(fā)現(xiàn)uPAR在體內(nèi)和體外衰老細(xì)胞中都有高表達(dá)。有趣的是，缺乏跨膜區(qū)域的一種可溶性u(píng)PAR (suPAR)是SASP反應(yīng)期間分泌的一種成分。suPAR的存在是一些慢性疾病的標(biāo)志，包括糖尿病和腎病 ，衰老在這些疾病中起作用。
uPAR是一種細(xì)胞表面和分泌的衰老生物標(biāo)志物.2020 Nature https://doi.org/10.1038/s41586-020-2403-9
在確定uPAR作為衰老細(xì)胞的普遍標(biāo)志后，研究人員設(shè)計(jì)了靶向uPAR的CAR T細(xì)胞。鑒于癌變前的細(xì)胞(那些可能在成為癌細(xì)胞)出現(xiàn)衰老以及很多抗癌治療導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞進(jìn)入衰老來阻止他們的分裂，研究人員調(diào)查了這些CAR T細(xì)胞是否可以有效治療癌癥。
研究結(jié)果顯示，以 uPAR為靶點(diǎn)的CAR T細(xì)胞治療可以消除小鼠肝癌和肺癌模型中衰老的前惡性和惡性細(xì)胞。已經(jīng)有人提出，通過后續(xù)針對(duì)衰老細(xì)胞的治療，抗癌療法可能會(huì)得到改善。研究人員在小鼠身上的研究證實(shí)了這種使用具有senolytic CAR T細(xì)胞的方法提高了抗癌治療的有效 性。
使用senolytic CAR - T細(xì)胞的部分吸引力在于其治療衰老涉及的許多疾病的潛力。事實(shí)上，該研究證明，如果小鼠接受senolytic CAR T細(xì)胞治療，可以改善非酒精性脂肪性肝炎(一種嚴(yán)重的脂肪肝)動(dòng)物模型的肝纖維化結(jié)果。
8月18日，中國(guó)科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)卓越創(chuàng)新中心（生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所）許琛琦研究組與上?？萍即髮W(xué)王皞鵬課題組以及復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院吳海濤課題組在國(guó)際學(xué)術(shù)期刊Immunity上以封面文章的形式發(fā)表了一項(xiàng)研究，提出了一種新型的“可循環(huán)CAR”設(shè)計(jì)方案，顯著提高了CAR-T細(xì)胞在體內(nèi)的持續(xù)活性和抗腫瘤效果，為防止CAR-T治療后的腫瘤復(fù)發(fā)提供了新策略。
Immunity. doi:10.1016/j.immuni.2020.07.011
在該項(xiàng)研究中，研究人員首次證明了CAR受體在結(jié)合腫瘤抗原后會(huì)發(fā)生泛素化修飾及溶酶體介導(dǎo)的CAR的降解，從而導(dǎo)致細(xì)胞表面CAR受體水平顯著 下調(diào)。研究人員進(jìn)一步把CAR胞內(nèi)段的泛素化位點(diǎn)賴氨酸K突變?yōu)榫彼酭（CARKR），阻斷了CAR的泛素化修飾及溶酶體的降解，抑制了CAR的下調(diào)過程。改造后的CAR相較于傳統(tǒng)的CAR能夠賦予T細(xì)胞更強(qiáng)的抗腫瘤效果和持續(xù)活性。
機(jī)制性探索發(fā)現(xiàn)，改造后的CAR在T細(xì)胞中循環(huán)（recycling），并在激活后富集在胞內(nèi)內(nèi)體（endosome）中，其胞內(nèi)段4-1BB結(jié)構(gòu)域仍然結(jié)合著信號(hào)傳遞分子TRAF2，在胞內(nèi)執(zhí)行信號(hào)傳遞功能，因而增強(qiáng)了4-1BB下游信號(hào)，促進(jìn)了T細(xì)胞的代謝重編程（提高線粒體的生成及氧化磷酸化代謝）及中央型記憶T細(xì)胞的分化。研究團(tuán)隊(duì)將這種全新的設(shè)計(jì)命名為可循環(huán)CAR（Recyclable CAR）。這些結(jié)果為后續(xù)可循環(huán)CAR的臨床驗(yàn)證提供了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
